Что такое анализ рцг

Определение фракции трансферрина (CDT) (диагностика злоупотребления алкоголем)

Что такое анализ рцг

[06-236] Определение фракции трансферрина (CDT) (диагностика злоупотребления алкоголем)

5330 руб.

Углеводдефицитный трансферрин – биомаркер хронического употребления алкоголя (более 60 граммов этанола в сутки).

Синонимы русские

Углеводдефицитный трансферрин (УДТ), карбогидрат-дефицитный трансферрин.

Синонимы английские

Carbohydrate-deficient transferrin (CDT), % CDT.

Метод исследования

Высокоэффективная жидкостная хроматография.

Единицы измерения

% (проценты).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона  алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед анализом (по согласованию с врачом).
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение за 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Трансферрин – сывороточный белок, главная функция которого – транспорт железа. В крови он присутствует в виде изоформ с различным количеством присоединенных остатков сиаловых кислот (в молекуле трансферрина их может быть до 8). В крови основной формой трансферрина является тетрасиалотрансферрин.

При употреблении алкоголя в большом количестве гликозилирование трансферрина нарушается и в крови возрастает концентрация других его изоформ с меньшим количеством остатков сиаловых кислот (асиало-, моно-, дисиалотрансферринов). Их и оценивают как суммарный углевод-дефицитный трансферрин (CDT).

Уровень карбогидрат-дефицитного трансферрина значительно возрастает при ежедневном употреблении более 60 граммов этанола (4-5 алкогольных напитков или 0,75 литра вина в день) в течение не менее двух недель. При однократном приеме высоких доз спиртных напитков концентрация углеводно-дефицитного трансферрина в крови не изменяется.

Период полувыведения трансферрина составляет 2 недели, поэтому после прекращения употребления алкоголя показатель нормализуется в вышеуказанный срок.

Специфичность CDT для диагностики хронического злоупотребления спиртными напитками составляет 80-90  %, чувствительность – 60-70  %.

Исследование, выполненное с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), обладает значительным преимуществом перед иммунологическим методом в плане специфичности и чувствительности.

CDT оценивается в относительных единицах ( % от общего трансферрина), поэтому наличие анемии не влияет на результат анализа.

Углеводдефицитный трансферрин – более специфичный показатель для диагностики алкоголизма, чем гамма-глютамилтранспептидаза (ГГТП) и средний объем эритроцита (MCV).

Однако отдельное назначение CDT (без дополнительных анализов) в качестве скрининга не рекомендовано в связи с его недостаточной чувствительностью.

Необходимо также учитывать, что уровень углевод-дефицитного трансферрина повышается при врождённых нарушениях гликозилирования, галактоземии, беременности и применении гормональных препаратов.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики хронического употребления высоких доз алкоголя;
  • для оценки эффективности лечения алкоголизма;
  • для мониторинга абстиненции в целях выявления рецидивов алкоголизма;
  • для дифференциальной диагностики причин изменений функции печени, изменений поведения.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на злоупотребление алкоголем;
  • при наличии клинических данных и изменений в лабораторных анализах, которые могут быть ассоциированы с употреблением алкоголя (повышение ГГТП, изменение соотношения АЛТ/АСТ, нарушение функции печени, поджелудочной железы, психоневрологические изменения);
  • при наблюдении за пациентами с риском рецидива алкоголизма.

Что означают результаты?

Референсные значения

Отсутствие употребления алкоголя в течение 2 недель: < 1,2 % от общего трансферрина.

Употребление алкоголя в течение 2 недель: > 2,5 % от общего трансферрина.

Причины повышения CDT:

  • злоупотребление алкоголем в дозе более 60 граммов этанола в сутки в течение не менее двух недель;
  • врождённые нарушения гликозилирования.

Что может влиять на результат?

  • Результаты исследования могут быть искажены при беременности, приеме гормональной заместительной терапии, врождённых нарушениях гликозилирования (например, карбогидрат-дефицитном гликопротеиновом синдроме Iа типа), галактоземии, врождённом нарушении толерантности к фруктозе.
  • Исследование более специфично для мужчин, чем для женщин.
  • Прием лекарственных препаратов (антидепрессантов, дисульфирамов) не вызывает значительных изменений в результате данного анализа.

Важные замечания

  • Уровень CDT снижается до нормы через 2 недели после прекращения употребления алкоголя. Однократные приемы высоких доз алкоголя не вызывают повышения этого показателя.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Нарколог, психиатр, невролог, гастроэнтеролог, терапевт, судмедэксперт, токсиколог

Литература

  • Fleming MF, Anton RF, Spies CD: A review of genetic, biological, pharmacological, and clinical factors that affect carbohydrate-deficient transferrin levels. Alcohol Clin Exp Res 2004;28(9):1347-1355.
  • Golka K, Wiese A. Carbohydrate-deficient transferrin (CDT)–a biomarker for long-term alcohol consumption. J Toxicol Environ Health B Crit Rev. 2004 Jul-Aug;7(4):319-37.
  • Tavakoli H.R., Hull M., Okasinski Lt.M. Review of current clinical biomarkers for the detection of alcohol dependence. Innov.Clin.Neurosci. 2011,8,3,26-33.

Источник: https://helix.ru/kb/item/06-236

Особенности бронхиальной астмы у детей при бактериальной контаминации верхних дыхательных путей — Практическая медицина — Практическая медицина. Журнал для практикующих врачей и специалистов

Что такое анализ рцг

Целью исследования явилось изучение особенностей течения бронхиальной астмы у детей с микробной обсемененностью и воспалительной реакцией слизистых оболочек верхних дыхательных путей.

Полученные данные обосновывают необходимость своевременного выявления микробной контаминации и санации верхних дыхательных путей (ВДП) что позволит оптимизировать лечение, уменьшить длительность обострений БА у детей с бактериальным обсеменением слизистой ВДП.

Features asthma in children with bacterial contamination of the upper respiratory tract

The aim of the research was to study features of the duration bronchial asthma in children with colonization and inflammatory reaction of the mucous membranes of the upper respiratory tract.

The data obtained substantiate the need for prompt identify microbial contamination and readjustment the upper respiratory tract infection (URI) that will optimize treatment, reduce the duration of asthma exacerbations in children with bacterial colonization of the mucous URI.

В последние годы достигнуты значительные успехи в лечении бронхиальной астмы (БА), которые связаны с применением ингаляционных глюкокортикостероидов, бронхолитиков, антигистаминных средств [1].

Однако в ряде случаев имеет место затяжное течение обострений заболевания, торпидность к проводимой терапии. Так, по нашим данным, среди детей, проходивших лечение в 2009-2010 гг.

в Самарском областном пульмонологическом центре, затяжное течение имело место в 30% случаев.

Согласно современным представлениям БА является атопическим заболеванием, в основе которого лежит аллергическое воспаление дыхательных путей. Однако в развитии болезни придается определенное значение и респираторным инфекциям, особенно у детей [2-12].

Существует обоснованное мнение о роли бактерий, грибов и вирусов как сенсибилизирующих факторов при БА, усугубляющих атопию, способных модифицировать течение заболевания [2,3]. По мнению А.Г. Чучалина, А.Б. Малахова и других авторов, микробная контаминация дыхательных путей нередко провоцирует и поддерживает обострения БА.

При этом развивается бактериальное воспаление, усиливается секреция мокроты [1, 13].

Рядом исследователей установлена высокая обсемененность дыхательных путей у пациентов с БА. У детей в 40-80% случаев выявляются хронические очаги инфекции в ЛОР-органах, что приводит к частым обострениям БА, затрудняет диагностику и лечение [14, 15, 16, 17].

Вовлечение в патологический процесс верхних дыхательных путей у ребенка с БА способствует утяжелению заболевания с развитием поливалентной сенсибилизации, поскольку при этом снижается барьерная функция слизистой по отношению к экзогенным аллергенам [16, 18].

Имеет место прямая корреляция между воспалительной реакцией верхних дыхательных путей (ВДП) и бронхиального дерева. В основе этого сочетания лежит единый IgЕ-зависимый механизм воспаления слизистой оболочки верхних и нижних дыхательных путей [18, 19, 20, 21].

При отсутствии своевременной диагностики микробной контаминации ВДП и их санации, сенсибилизация развивается по типу цепной реакции с расширением круга аллергенов, усугублением клинических проявлений заболевания, вовлечением в патологический процесс новых органов-мишеней [22].

С целью выявления микробной контаминации ВДП чаще всего исследуется мазок из зева, но для получения результатов посева требуется 5-7 дней, а принимать решение по лечению больного необходимо сразу после его обращения к врачу.

Поэтому возникает необходимость в применении методов экспресс-диагностики биологического материала, позволяющих определить характер, тип и степень активности воспаления ВДП [23].

Одним из перспективных в этом отношении методов является цитологическое изучение мазков-отпечатков слизистой оболочки носа — риноцитография (РЦГ) [23, 24].

Цель. Изучить особенности течения бронхиальной астмы у детей с микробной обсемененностью и воспалительной реакцией слизистой оболочки верхних дыхательных путей.

Пациенты и методы. Для реализации цели исследования нами был обследован 71 ребенок в возрасте от 6 до 17 лет, находившийся на лечении в отделении детской пульмонологии СОКБ им. М.И. Калинина по поводу обострения БА, преобладали мальчики (54,9%), средний возраст детей 9,1+0,7 лет.

Контрольную группу составили 30 условно-здоровых детей соответствующего возраста, при обследовании которых нами были выработаны критерии нормальной РЦГ. Диагноз БА устанавливали в соответствии с критериями Национальной программы «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика» (2008).

Помимо общеклинических методов, у детей проводилось определение уровня иммуноглобулинов классов Е, A, M, G в сыворотке крови, выявление специфических антител к Mycoplasma pneumoniae и роду Chlamydia (Cl.

pneumoniae и Cl. psittaci), лямблиям, гельминтам, соскоб с языка на грибы. Инструментальное обследование включало определение функции внешнего дыхания (ФВД), рентгенографию органов грудной клетки.

Все дети были осмотрены ЛОР-врачом.

С целью определения степени обсемененности дыхательных путей и идентификации возбудителей использовался бактериологический метод (мазок из зева на флору).

Материал для посева забирали натощак до чистки зубов и споласкивания полостей рта, носа и глотки.

Затем производился посев на чашки Петри с 5% кровяным агаром и шоколадным агаром, материал инкубировался в течение суток при 37°С.В дальнейшем проводилась видовая идентификация колоний.

Критерием бактериальной обсемененности мы считали наличие роста условно-патогенной флоры в титре 105 или более колониеобразующих единиц в 1 мл (КОЕ/мл), высев двух и более видов микроорганизмов.

По результатам посева были выделены две группы — 34 ребенка с бактериальной обсемененностью ВДП (основная или 1-я группа) и без нее 37 детей (2-я группа или группа сравнения), таким образом, по нашим данным, частота бактериальной обсемененности ВДП у детей с БА составила 47,9%.

Забор материала проводился со слизистой нижней носовой раковины ватным тампоном, мазок-отпечаток наносился на предметное стекло тонким слоем, высушивался, окрашивался по Романовскому–Гимзе, сушился при комнатной температуре, затем микроскопировался под иммерсией с 750–кратным увеличением.

Имеются данные о том, что в норме у взрослых людей в мазке должны преобладать нейтрофильные лейкоциты (до 56%) [25].

Согласно полученным нами данным, у детей старше 5 лет в норме удельный вес нейтрофилов в РЦГ не должен превышать 64 % (Удостоверение на рационализаторское предложение №105 выдано ГОУ ВПО «СамГМУ Минздравсоцразвития России» 22.12.10).

Повышение этого порога расценивалось нами как нейтрофильное воспаление и признак бактериальной обсемененности. Данное исследование — РЦГ является информативным и доступным методом, легко выполнимым в условиях любой клинической лаборатории.

Результаты. Клинико-анамнестический анализ показал, что среди наблюдаемых детей преобладали легкая и средне-тяжелая формы заболевания, значимых различий между группами по степени тяжести заболевания не обнаружено, у всех детей с БА продолжительность заболевания на начало наблюдения была не менее 1 года (таблица 1).

Таблица 1.

Распределение детей в исследуемых группах по степени тяжести бронхиальной астмы

ГруппысравненияТяжестьС бактериальной обсемененностью ВДП (n=34)Без бактериальной обсемененности ВДП (n=37)
Абс. число%Абс. число%
Легкая 17 50,0 20 54,1
Среднетяжелая 15 44,1 15 40,5
Тяжелая 2 5,9 2 5,4
Всего 34 100 37 100

Базисную противовоспалительную терапию (ингаляционные глюкокортикостероиды или кромоны) получали 52 ребенка: 22 ребенка (64,7%) в 1-й группе и 30 (81,1%) во 2-й.

В основной группе базисная терапия назначалась реже, что, по-видимому, объяснялось рецидивированием признаков инфекционных поражений ВДП (гнойная мокрота, эпизоды гипертермии, обострения воспалительных заболеваний ЛОР-органов) и опасениями генерализации инфекции на фоне ИГКС.

Начало заболевания в обеих группах чаще приходилось на дошкольный возраст. Но в группе детей с обсемененностью ВДП дебют почти в половине случаев отмечался в возрасте до 3 лет, а во 2-й группе в возрасте от 3 до 6 лет (таблица 2).

Таблица 2.

Возраст дебюта бронхиальной астмы в исследуемых группах

Возраст в годахС обсемененностью ВДП (n=34)Без обсемененности ВДП (n=37)
Абс. кол-во%Абс. кол-во%
До 31647,11437,8
3-71132,41746,0
8-12514,638,1
13 и более25,938,1
Всего:34100,037100,0

Возможно, повышенный риск развития БА у детей раннего возраста, ассоциируется с частыми респираторными инфекциями на фоне транзиторной иммунологической незрелости, обусловливая формирование очагов хронических инфекций в ВДП. Хроническая ЛОР-патология в виде аденоидов, тонзиллита, синусита отмечалась в 44,1% случаев в основной группе и в 21,6% в группе сравнения.

Анамнестически выявлено, что у 72,3% детей из 1-й группы и у 20% из 2-й дебют БА был связан с частыми респираторными инфекциями, которые, по-видимому, приводили к развитию гиперреактивности бронхов. Контакт с аллергеном назывался как причина первого эпизода обструкции почти в 3 раза чаще во 2-й группе, различия достоверны (p

Источник: http://pmarchive.ru/osobennosti-bronxialnoj-astmy-u-detej-pri-bakterialnoj-kontaminacii-verxnix-dyxatelnyx-putej/

ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

Что такое анализ рцг

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

В конце статьи см. словарь
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).
В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце. Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

Специфичность и применение

ПЦР – метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП).
Также, этим методом проводят диагностику вирусных инфекций, таких как гепатиты, ВИЧ и др. Чувствительность метода значительно превосходит таковую у иммунохомических и микробиологических методов, а принцип метода позволяет диагностировать наличие инфекций со значительной антигенной изменчивостью.
Специфичность ПЦР при использовании технологии PCR даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%. Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно.
Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях.
Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике – для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ – вирусов папилломы человека; в пульмонологии – для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии – для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний – в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии – для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов.
Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами – короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 – 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка. После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

Проведение ПЦР

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

  • ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
  • два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
  • термостабильная ДНК-полимераза;
  • дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
  • ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
  • буферный раствор.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции.
Ход реакции

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 – 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий.

Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 – 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 – 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись.

Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 – 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 – 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 – 2 минут.

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C.

Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований.

После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 – 15 мин.

Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО  в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой – позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

Словарь

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота – биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. Основная роль ДНК в клетках — долговременное хранение информации о структуре РНК и белков.

РНК– рибонуклеиновая кислота – биологический полимер, близкий по своему химическому строению к ДНК. Молекула РНК построена из тех же мономерных звеньев – нуклеотидов, что и ДНК. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки. У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку.

РНК синтезируется на ДНК-матрице. Процесс этот называется транскрипцией. В ДНК имеются участки, где содержится информация, ответственная за синтез трех видов РНК, различающихся по выполняемым функциям: информационной или матричной РНК (мРНК), рибосомальной (рРНК) и транспортной (тРНК). Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка.

Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК.

Нуклеоти́ды – основная повторяющаяся единица в молекулах нуклеиновых кислот, продукт химического соединения азотистого основания, пятиуглеродного сахара (пентозы) и одной или нескольких фосфатных групп.

Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу.

Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию – адениновый (A), содержащий аденин, гуаниновый (G) – гуанин, цитозиновый (C) – цитозин, тиминовый (Т) – тимин, урациловый (U) – урацил.

В состав ДНК входят 4 типа нуклеотидов – A, T, G, C, в состав РНК также 4 типа – A, U, G, C. Сахаром в составе всех нуклеотидов ДНК является дезоксирибоза, РНК – рибоза. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания.

Праймер – котроткая ДНК, используемая для репликации матричной цепи. Каждый из праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка. 

Литература

  1. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. — М.: Мир, 2002. — 589 с., илл. ISBN 5-03-003328-9

Источник: https://www.invitro.ru/library/labdiagnostika/16110/

ВидБолезни
Добавить комментарий